생쥐 착상전 배아에서 산화적 스트레스에 의한 ATF4 유전자의 발현과 존재 부위

Abstract

Reactive oxygen species (ROS) generated in cellular metabolism have an effect on ell maturation and develoment. In human reductive tracti ve injury by ROS may indexe female infertility. Als oxidative injury may be responsible for developmental retardation and rest of mammalian preimplantation embryos Activating transcription factor 4 (ATF) is a member of the cyclie-AMP response ekment-binding ICRES family of basic region ine zipper / NTF4 is known to be stress response to protect cell from a stress factors and indeer of pepties. The purpose of this study was to investigate whether ATF4 is involved in the defensive mechanism in orcidative stress condition during the development of m ecimplantation embryo. To verify the extension of ATF4 in dative stress condition, 2-cell stage embryos were cultured in HTF media containing 0.1 MM 0.5 m or mi hydrogen peroxide (HOS for 1hr -cell, 8 hr (4-oil, 17 hr 18-cell, 24 hr wir 18 he cry bastocyst) or 54 be bote bastocyst. The developmental rate decreased in the OlmMH-0. rated group C ed with col group. In embryos treated with 05 ml and I mM HO showed 2-cell block. As a results of the semi-antitative HT-PCR analysis of SODI, ATF4 and Bax gene expression, SODI, ATF4 and Bax gees were increased in 1 ml 05 m, 1 mM HO, treated groups compared with control group in 2-cell embryos, expression of SODI. ATF4 and Bax genes were itably increased in 1 mM, 0.5 mL, 1 mM HO, treated gros cumped with control grow Immunorescence analysis showed that ATF4 rotein was localized at the cytoplasm of preimplantation embryos The increase in ATF4 imm a ctivey was observed in the 0.1 mil05 mm, 1 mM H 0 treated groups compared with control Bro . Il suggests that oxidative stress by H.O. inches expression of ATF4 and may be involved in parte in m anism in preimplantation embryos from xidative injury.

세포의 대사과쟁에서 생성되는 성산소 Teactive axygen : 180K)은 세포 의 성숙과 과정을 저해하며, 인간의 생식 수관에서 임의 원인이 된다. 많은 세포생물 학적 연구를 통해 에 대한 세포 내의 보호 기작이 지고 있다. Artivaling rumscriptim Taarice 4 (ATFA) 는 제도 내에서 산화적 스트레스를 비롯한 여러 스트레스 요 인으로부터 세포를 보호하는 기작에 관여하는 중요한 인자로서, 스트레스에 의한 세포 사면 을 유도하는 유전자의 활성화와 관련이 있다고 말려져 있다. 본 연구에서는 각상 전 초기 세아의 발생단계에서 ROS에 의한 산화적 스트레스가 배아의 발생에 영향을 준다는 보고와 관련하여 생 초기에 산화적 스트레스 요인인 HOInstrougem cruide) 를 처리한 후 ATFA 유전자의 발현 변화를 추적하였으며, ROS 방어에 관여하는 SODI 유전자와 opteris 유전자인 Baix의 현 양상을 함께 비교하였다. 또한 면역행 을 이용하여 책상전 초기 배아의 ATFA 단백질 발현 부의를 조사하였다. HO를 0.1 mM 농도로 처리한 - 세포기 아에서는 처리 8시간 후인 4- 세포기 단계부터 반용이 감소하기 시작하였으며 DG mM 1.0 m 농도에서는 이의 발생이 진행되지 않았다. RT-PCR S101 유진 자의 발원은 이를 처리한 모든 그에서 처리 1시간인 2기 단계에서 대조군 보다 증가하였으며, ATFA 유전자 역시 2세기 단계에서 이 증가하였다. B. ATFA 단절 레아 세포내 주위는 스트 스 방어 기작이 주로 일어나는 세포에서 이 말이 되었으며 포대기 배아에서는 제 포기 Timer coil 보다는 명의 Striheetadeem 에서 발 을 확인하였다. 2- 세기 아에서 ATFA immsmsnctivity는 모든 아동도 처리 군에서 대조군보다 증가하 했다. 이상의 결과에서 착상 전 초기 아에서 ROS 의 ATF의 말이 유도 확인과 했다.