인체기도상피세포와 마우스에서 Colchicine IL-1 receptor antagonist의 생성에 관한 연구

Abstract

목적: Colchicine은 통풍, 건선, 베체트병의 치료제로서 항염증효과를 지니고 있다. 천식에서 colchicine은 후기천식반응을 억제하고 스테로이듸 비의존성 환자에서 효과가 있다는 보고가 있다. Colchicine의 작용기전은 잘 알려져있지 않으나, 세포질내 미세관(microtubule)에 작용하여, 폐포대식세포에서 매개물질 방출을 억제하고 cAMP의 증가를 야기한다. Colchicine이 항염증사이토카인의 하나인 interleukin(IL)-1 receptor antagonist(IL-1Ra)의 생성에 관여할 것이라는 가설을 설정하고 이를 검증하고자 하였다. 방 법: 정상 성인의 기관지상피세포에 자극이 없는 대조군과 Colchicine자극을 가한 군으로구분하였다. 각각의 군에서 배양 상층액(SN)을 획득했고, Cell Lysat(CL) 및 총 RNA를 얻었다. SN에서 IL-1 Ra의 농도를 ELISA법으로 측정하였다. SN과 CL로 IL-Ra에 대한 immunoblot을 시행하고 획득한 총 RNA로 RT-PCR을 시행하였다. 또한 마우스에서 colchicine을 3 mg/Kg로 주사 후 폐조직 lysate에서 IL-1 Ra에 대한 Northern blot을 시행하였다. 성 적: 1)SN의 IL-1 Ra의 농도와 SN 및 CL으로 시행한 Immunoblot에서 colchicine 자극이 있는 군에서 대조군보다 유의하게 증가하였다. 2) Colchicine은 IL-1 Ra의 발현에 있어서 전사레벨에서는 유의한 영향이 없었다. 3) Lumicolchicine과 trimethylcolchicine은 IL-1 Ra의 농도에 유의한 영향이 없었다. 4) 대조군 마우스에 비해 colchicine을 처리한 마우스에서 IL-1 Ra mRNA transcript의 유의한 증가가 있었다. 결 론: 이상의 결과로 colchicine의 항염증작용의 기전에 IL-1 Ra가 관여할 가능성이 있고, IL-1 Ra의 생성기전은 해독 혹은 해독 후 기전에 의한 것임을 알 수 있었다. 또한 in vivo에서도 colchicine이IL-1 Ra의 생성을 증가시켰다.