상품화된 HBsAg 정성 검사 시스템 3종과 HBsAg 정량 검사 시스템 2종의 분석능 평가

Abstract

배경: 간염 검사법들은 과거부터 꾸준하게 개선되어 왔으나 저농도 혈청 값, 비특이반응, 돌연변이 등으로 인하여 위음성 결과 들이 보고되어 주요 공급사들에서는 특이도가 높은 단클론 항체와다클론 항체들을 사용하고 항체의 종류를 추가하여 불일치 반응들을 줄이고자 하였다. 따라서 최근에 새로이 개발된 주요 검사법들을 이용하여 그 분석능을 비교하고자 하였으며, 정성검사 값을정량검사로써 준용하여 해석하려는 사례들이 있으므로 정성검사index value와 정량검사 농도 값을 비교하고자 하였다. 방법: HBsAg 검사에서 음성, 약양성, 강양성 결과를 보인 검체, 환자군별로 구분한 간치료군과 간이식군의 검체, 혈청은행에서 양성으로 확정된 검체들을 포함한 총 432검체들을 대상으로 주요 3사의 제품들로 정성검사와 정량검사를 실시하였다. 약양성 검체들은 강양성 검체들을 희석하여 약양성 결과를 보이도록 제조하였으며, 이들을 대상으로 정성검사와 정량검사를 실시하였다. 강양성 검체들을 18단계 계대 희석하여 제조한 검체들을 대상으로 정성검사와 정량검사를 실시하였다. 결과: 세 회사 장비 간의 정성검사 일치율은(425/432, 98.3%)로 매우 우수하였다. 음성 검체에서 정성검사의 결과 값은 세 회사 장비에서 모두 일치하였으나 index 값을 0.25범위로 나누어 본 결과0.75-1.0 미만인 검체들은 Architect (2%)와 Centaur XP (8%)에 비하여 E170 (12%)에서 더 많았다. 또한 Architect 3검체(2.43%)에서정성검사와 정량검사 간의 차이를 보였다. 양성 결과 값을 보인309검체에서 Architect 6검체(1.94%), E170 14검체(4.53%)에서 정성과 정량간의 결과 값이 달랐고 index 값은 1.29-3.76 S/CO범위에있었다. 약양성으로 제조한 65검체들에서 정성 검사 평균 값은 Architect3.6 S/CO, E170 4.2 COI, Centaur XP 11.4 index value였고Architect과 E170 (P<0.0001), E170과 Centaur XP (P<0.0001), Architect과Centaur XP (P<0.0001)에서 유의한 차이를 보였다. 간치료군과 간 이식군에서의 세 회사 간의 정성 검사와 정량 검사 결과는 모두 일치하였다. 강양성 검체들을 18계단 희석한 검체들에서직선성을 보이지 않았다. 결론: 음성 검체 일부에서는 index value가 상대적으로 높게 나타나서 위양성을 보이거나 항원-항체 모두 양성 결과를 보일 위험이있다. 이는 장비의 백그라운드 값이 높아지거나 시약의 비특이 반응으로 나타날 수 있으므로 정기적인 장비 관리와 적절한 시약의선택이 필요하다. 약양성 검체들에서 정성검사에서는 양성이지만정량검사에서는 음성인 검체들이 보이므로 정량검사에서는 위음성으로 판정될 수도 있다. 그러므로 정량검사 결과로 정성검사를판정하여서는 안되며 단지 모니터링에서만 사용하여야 한다. 강양성 검체들을 계단희석하여 제조한 검체들에서 정성검사와 정량검사들은 검체별로 서로 상이한 결과를 보이므로 정성검사에서 보고되는 index value를 정량검사의 결과로 준용하여 해석해서는 안된다.

Background: Currently used techniques for quantitation of HBsAg often yield discordant results; therefore, development of quantitation techniques that can detect HBsAg with high accuracy has become very important. Recent advances have led to the development of several HBsAg detection systems. Here, we evaluated the performance of 3 newly developed detection systems, which can detect HBsAg both qualitatively and quantitavely, and determined the concordance among their results. Methods: Four hundred and thirty two samples assigned to 4 groups-patient group, dilution group, weakly reactive group, and linearity groupwere subjected to qualitative and quantitative detection of HBsAg by using the 3 systems developed by 3 major manufacturers; Abbott Architect,Roche E170 and Siemens Centaur XP. Results: The results for the qualitative analyses were closely concordant among the three systems (98.3%) for all 432 samples. In 123 samples that were determined as HBsAg-negative, E170 (76%) distributed frequently at the upper half level (0.5-1.0) of negative reference range, compared with Architect (11%) and Centaur XP (22%). In particular, in 65 samples that were diluted from the strongly positive samples to obtain weakly positive samples, the average index values obtained using Architect (3.6 S/CO), E170 (4.2 COI) and Centaur XP (11.4 index value) differed significantly (P <0.0001). In the antiviral treatment group and the post-liver transplantation group, no inconsistency was observed among the results of the qualitative and quantitative assays. In the 18-fold serially diluted samples, no linearity was observed. Conclusions: Because of the possibility of false-positive detection in the HBsAg-negative samples, regular management of equipment and appropriate selection of reagents are very important. In weakly positive samples, quantitative assay has not to be replaced for qualitative assay. Therefore, the qualitative assays should be used for screening the samples, whereas the quantitative assays should be used for monitoring the Hepatitis B virus (HBV) load in the samples determined as HBsAg-positive. The qualitative index value should not be interpreted as a quantitative measure of HBV load.