Retroviral vector를 이용한 시토크롬 p450 3A4 및 환원효소 형질도입 Chinese hamster ovary 세포주 확립
DC Field | Value | Language |
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dc.contributor.author | 박장환 | - |
dc.date.accessioned | 2021-08-04T08:22:04Z | - |
dc.date.available | 2021-08-04T08:22:04Z | - |
dc.date.created | 2021-06-30 | - |
dc.date.issued | 2002-05-03 | - |
dc.identifier.uri | https://scholarworks.bwise.kr/hanyang/handle/2021.sw.hanyang/78271 | - |
dc.description.abstract | 재조합 사람 cytochrome p450 3A4 (CYP3A4)와 cytochrome p450 환원효소 (CYPR)를 동시에 발현시키기 위하여 internal ribosome entry site (IRES)를 이용한 bicistronic retroviral plasmid (HCYP3A4BC4-LNCX2)를 제조하였다. Calcium phosphate 법으로 HCYP3A4BC4-LNCX2 플라스미드를 293GPG packaging 세포주에 transfection하여 retrovirus를 생산하고 Chinese hamster ovary (CHO) 세포주에 transduction하였다. Western blot으로 CYP3A4와 CYPR의 발현을 확인한 후 한계희석법으로 단세포클로닝 하여 유전자전이 세포주 CHO.3A4BC4-LNCX2를 확립하였다. CHO.3A4BC4-LNCX2 세포를 용해하여 Western blot을 시행한 결과 CYP3A4와 CYPR의 분자량은 각각 57kDa, 76kDa 이었다. 2-aminoanthracene (2AA), 2-amono-3,4-dimethyl-imidazo[4,5-f]quinoxaline (MeIQx), aflatoxin B1 (AFB1), aflatoxin B2 (AFB2) 및 aflatoxin G1 (AFG1)이 미치는 세포독성을 측정한 결과 CHO.3A4BC4-LNCX2 세포주는 100 μM 2AA, 25μM MeIQx, 0.5μM AFB1, 50μM AFB2 그리고 5μM AFG1 이상에서 이상에서 각각 세포독성의 증가를 나타내었다. 이상의 결과로 본 연구에서 수립된 CYP3A4 및 CYPR 연속발현 CHO.3A4BC4-LNCX2 세포주는 CYP3A4에 의한 대사활성능을 발현하는 것을 알 수 있으며, 이는 앞으로 in vitro 대사활성화를 위한 독성검사 모델 및 cytochrome p450 작용기전 연구에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 추정된다. | - |
dc.publisher | 기초의학협의회 | - |
dc.title | Retroviral vector를 이용한 시토크롬 p450 3A4 및 환원효소 형질도입 Chinese hamster ovary 세포주 확립 | - |
dc.type | Conference | - |
dc.contributor.affiliatedAuthor | 박장환 | - |
dc.identifier.bibliographicCitation | 기초의학학술대회 | - |
dc.relation.isPartOf | 기초의학학술대회 | - |
dc.citation.title | 기초의학학술대회 | - |
dc.citation.conferencePlace | COEX | - |
dc.type.rims | CONF | - |
dc.description.journalClass | 2 | - |
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