돼지설사병 방제용 CTB::fasG 형질전환 벼 및 캘러스의 도입유전자 발현

Abstract

돼지설사병 방제용 식물경구백신을 개발하고자 점막면역보조제인 Cholera toxin subunit B (CTB) 유전자와 설사병을유발시키는 대장균 987P-fasG 유전자를 연결시킨 CTB::fasG DNA 카세트로 벼를 형질전환시켰다. 벼에 삽입된 도입유전자의 copy수를 T₁및 T₂세대의 종자를 대상으로 TaqMan probe법으로 분석한 결과 1 개부터 8 개까지의 유전자가 복수로 도입된것으로 확인하였다. 형질전환체 T₁및 T₂세대에서의 mRNA의발현량은 Quantitative real time-PCR로 분석한 결과 기준치에비해 최대 35배까지 나타났다. 또한 형질전환체를 조직배양하여생성된 callus를 장시간 계대배양시키며 저장기간 별로 도입유전자를 확인한 결과 계대배양 9개월까지 도입유전자가 유지됨을확인할 수 있었다. Callus에서의 mRNA의 발현량 역시 기준치의2.6배 정도로 유지됨을 확인하였다. 이와 같이 도입유전자를형질전환체 뿐만 아니라 callus에서도 확인할 수 있었으므로본 연구 결과는 식물유래 경구백신 개발의 기초자료로 활용될수 있을 것으로 판단된다.