Immunoaffinity Purification and Receptor Assay for Polymerized Human Serum Albumin of Pre-S2 Peptide on Hepatitis B Virus

Abstract

Recombinant pre-S2 peptide was purified to apparent homogeneity from E. coli by immunoaffinity chromatography using monoclonal antibody and studied for its binding characteristics with monoclonal antibody and pHSA (polymerized human serum albumin). A simple and sensitive assay method for detecting the activity of pHSA receptor on pre-S2 peptide of hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) has been developed using pre-S2-β-galactosidase fusion protein. The assay can be used for determining pre-S2 or factors neutralizing pHSA receptor activity. The sensitivity of the assay is about 10 to 100 pmol of pre-S2.

대장균내에서 과량 발현된 재조합 프리-S2 펩티드를 면역친화력 크로마토그래피에 의해 분리 정제하였으며, 이 펩티드에 대한 중합 인혈청 알부민(pHSA)의 결합을 연구하였다. 프리-S2 부위의 pHSA 수용체 활성을 검출하는 방법을 프리-S2-β-갈락토시다제 융합단백질을 이용하여 개발하였으며, 민감도는 10-100 pmol의 프리-S2에 해당되었다. 또한 이 방법은 프리-S2의 농도 결정 뿐 아니라 pHSA수용체 활성을 중화시킬 수 있는 인자들을 측정하는데 이용될 수 있다.